EVELYN ESTEFANIA OCHOA OCHOA

Prueba de PCR para detección de VIH (virus de inmunodeficiencia humana)

1. Tipo de muestra: La muestra biológica más comúnmente utilizada es el plasma sanguíneo obtenido por centrifugación de sangre total anticoagulada con EDTA. 

2. Extracción del ácido nucleico: La extracción de ácido nucleico, en este caso ARN del VIH, se realiza a partir del plasma obtenido. Primero, se añade un reactivo que rompe las partículas virales para liberar el ARN. Luego, se utilizan columnas de sílica o perlas magnéticas, que capturan el ARN mientras se eliminan otras sustancias no deseadas. Finalmente, el ARN purificado se recoge en una solución que se utiliza como base para realizar la prueba PCR. Este proceso permite obtener el material genético del virus necesario para su detección.

3. Tipo de PCR: La técnica empleada en la mayoría de los laboratorios clínicos es la PCR en tiempo real con transcripción reversa (RT-qPCR), que permite tanto la detección como la cuantificación del virus en una sola reacción.

4. Genes amplificados:

• Gen gag: Codifica proteínas estructurales del virus, como la cápside p24. Es uno de los objetivos mas frecuentes por su alta conservación.
• Gen pol: Codifica enzimas esenciales para la replicación viral, incluyendo la transcriptasa reversa, la proteasa y la integrasa.
• Gen env: Codifica las glicoproteínas de la envoltura viral, como gp120 y gp41. Su uso es menos común en pruebas rutinarias debido a su mayor variabilidad genética

5. Resultados cualitativos: Permite confirmar la presencia o ausencia del virus de VIH en la muestra; es útil para el diagnóstico en etapa aguda de infección (ventana serológica).

6. Resultados cuantitativos: Estos miden el número de copias de ARN viral por mililitro de plasma. La carga viral es un marcador clave para monitoreo de la progresión de la infección por VIH y evaluación de la eficacia del tratamiento antirretroviral.

Los resultados se expresan como copias/mL o como log10 de copias/mL. Los sistemas más modernos tienen un límite de detección entre 20 a 50 copias/mL, dependiendo del equipo y del kit comercial utilizado.

Imagen obtenida de: https://www.bioted.es/protocolos/DETECCION-VIH-RT-PCR.pdf

Video obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=Pujs3cSQR9g

Capturas de pantalla de cómo se realizo la búsqueda bibliográfica

Referencias bibliográficas

1. Brou EC, Touré A, Touré FS, Yaudé E, Dosso I, Konan M, et al. Vérification des performances de la méthode COBAS® AmpliPrep/COBAS® TaqMan HIV-1 test, v 2.0 pour la quantification de la charge virale plasmatique du VIH-1. Ann Biol Clin (Paris) [Internet]. 2025;83(3):0. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40445216/
2. García F, Álvarez M, Bernal C, Chueca N, Guillot V. Diagnóstico de laboratorio de la infección por el VIH, del tropismo viral y de las resistencias a los antirretrovirales. Enferm Infecc Microbiol Clin [Internet]. 2011;29(4):297–307. Disponible en: https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-diagnostico-laboratorio-infeccion-por-el-S0213005X10004994
3. ¿Cómo se diagnostica la infección por VIH? [Internet]. gTt-VIH. Grupo de trabajo sobre tratamiento del VIH (gTt-VIH); 2023 [citado el 6 de junio de 2025]. Disponible en: https://www.gtt-vih.org/aprende/diagnostico/como-se-diagnostica-la-infeccion-por-vih/