Técnicas de edición de Ácidos nucleicos CRISPR para formar organoides cerebralesTipo de edición
- Ex vivo: Se realizo en iPSCs humanas en cultivo, fuera de cualquier organismo vivo.
- Somática: Se modificaron el genoma de células diferenciadas in vitro, sin involucrar células germinales ni transmisión heredable.
iPSCs humanas que luego se diferenciaron en organoides corticales.
CRISPR‑Cas9, para reintroducir el alelo arcaico de NOVA1, reemplazando el alelo humano moderno.
Organoides corticales humanos, generados in vitro a partir de las iPSCs editadas, para modelar etapas tempranas de neurodesarrollo.
No se menciona una vía de administración ya que, todo fue aplicado in vitro, directamente sobre células en cultivo.
Desarrollo más lento de los organoides que llevaban la variante arcaica comparado con la versión moderna.
Mayor complejidad superficial: se redujo el tamaño y aumentó la rugosidad en los organoides arcaicos.
Disminución de proliferación celular y aumento de apoptosis.
Cambios en el perfil de expresión genética y en el splicing alternativo: se alteraron genes clave del neurodesarrollo mediante la variante arcaica de NOVA1.
Disminución en los marcadores sinápticos como SYN1 y PSD95.
Alteraciones en la función eléctrica neuronal de los organoides con NOVA1 arcaico, presentaron más estallidos neuronales espontáneos, menor sincronización y mayor heterogeneidad en frecuencia de disparo (FR) y coeficiente de variación (CV) entre neuronas. En conjunto, se evidencian redes neuronales menos sincronizadas y más variables.
Capturas de cómo se realizo la búsqueda bibliográfica
Referencia bibliográfica
- Trujillo CA, Rice ES, Schaefer NK, Chaim IA, Wheeler EC, Madrigal AA, et al. Reintroduction of the archaic variant of NOVA1 in cortical organoids alters neurodevelopment. Science [Internet]. 2021;371(6530):eaax2537. Disponible en: https://www.science.org/doi/10.1126/science.aax2537
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